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 摘要：槲皮素，又名櫟精，槲皮黃素，溶于冰醋酸，堿性水溶液呈黃色，幾乎不溶于水，乙醇溶液味很苦?？勺鳛樗幤?，具有較好的祛痰、止咳作用，并有一定的平喘作用。

      目的建立余甘子藥材中槲皮素含量測定的方法。方法HPLC法測定槲皮素含量。色譜柱為SHIMADZUVP-ODS（5μm，250mm×4.6mm），保護柱為大連中匯達(dá)C18，流動相：甲醇-0.4％磷酸溶液（含2.4g·L-1庚烷磺酸鈉）（50∶50），流速1.0ml·min-1，檢測波長373nm。結(jié)果進樣量在0.02～0.20μg范圍內(nèi)與色譜峰的峰面積呈良好的線性關(guān)系（r=0.9997），余甘子藥材平均加樣回收率為97.3%，RSD為0.99%（n=6）。結(jié)論該方法操作簡便、快速，有良好的精密度和準(zhǔn)確性，可用于余甘子藥材的質(zhì)量控制。

      「關(guān)鍵詞」余甘子；槲皮素；液相色譜法AbstractObjectiveToestablishamethodfordeterminationofthecontentofquercetininPhyllanthusemblicaL..MethodsQuercetinwasquantitativelydeterminedbyhighperformanceliquidchromagraphy（HPLC）。WithSHIMADZUVP-ODS（5μm，4.6mm×250mm）column，amixtureofmethanoland0.4％H3PO4（with2.4g·L-1C7H15SO3Na）（50∶50）wasusedasphase，theflowratewas1ml·min-1andUVdetectionwavelengthwasat373nm。ResultsThelinearrelationshipwasgoodwithintherangeof0.02～0.20μg（r=0.9997）。TheaveragerecoveryofChinesemedicinalplantPhyllanthuswas97.3%andtherelativestandarddeviationwasbelow0.99%（n=6）。ConclusionThemethodisfast，simple，accurateandreproducibleandcanbeusedforthequalitycontrolofPhyllanthusemblicaL.KeywordsPhyllanthusemblicaL.；Quercetin；HPLC余甘子為大戟科葉下珠屬（Phyllanthus）植物余甘子PhyllanthusemblicaL.的干燥成熟果實?！对颇鲜∷幤窐?biāo)準(zhǔn)》《藏藥標(biāo)準(zhǔn)》《中國藥典》均收載。別稱滇橄欖、橄欖、油甘子、望果；藏藥稱“久如拉”，傣藥稱“麻項幫”；古印度梵語稱“庵摩勒”。在云南地區(qū)常作橄欖使用，還是藏族習(xí)用藥材。味酸、甘、澀，主要用于治療胃痛、腸炎、黃疸型肝炎、淋巴結(jié)核、高血壓病等。研究表明余甘子具有抗氧化、抗癌、抗病毒、降血脂等作用［1］。余甘子主要含沒食子酸（Gallicacid）；鞣花酸（Ellagicacid）；1-O-沒食子酰基-β-D葡萄糖；3，6-二-O-沒食子?；?D-葡萄糖；訶子酸（Chebulinicacid）；槲皮素（Quercetin）；訶黎勒酸（Chcbtllagicacid）；鞣料云實精（Corilagin）；3-乙基沒食子酸（3-ethoxy-4，5-dihydroxy-benzoicacid）等，其中槲皮素主要以槲皮苷的形式存在。余甘子還含有大量維生素C（1.0%～1.8%），且含量穩(wěn)定［2］。本實驗采用液相色譜法測定余甘子藥材中槲皮素的含量。

      1儀器與試藥島津LC-20AT液相色譜儀、SPD-20A紫外檢測器、CBM-102色譜數(shù)據(jù)處理機；槲皮素對照品由中國藥品生物制品檢定所提供，甲醇、庚烷磺酸鈉為色譜純，其它試劑均為分析純，水為純凈水。

      余甘子藥材產(chǎn)地為云南省新平縣平甸鄉(xiāng)，春季采收干燥。經(jīng)作者鑒定為大戟科葉下珠屬植物余甘子PhyllanthusemblicaL.的果實。

      2方法與結(jié)果2.1色譜條件SHIMADZUVP-ODS（5μm，250mm×4.6mm）色譜柱，大連中匯達(dá)C18保護柱，甲醇-0.4％磷酸溶液（含2.4g·L-1庚烷磺酸鈉）（50∶50），流速1.0ml·min-1；柱箱溫度35℃，紫外檢測波長373nm，在上述條件下，樣品中槲皮素與其它峰分離度大于2.0，理論塔板數(shù)達(dá)10000以上，槲皮素峰拖尾因子在1.05～1.18之間，且樣品中其它組分色譜峰無干擾，見圖1。

      2.2對照品溶液的制備取槲皮素對照品適量，精密稱定，用甲醇溶解，制成含槲皮素0.010mg·ml-1的對照品溶液。

      2.3供試品溶液制備取余甘子粉末（過40目篩）約5g，精密稱定，加入250ml甲醇，加熱回流1.5h，回收甲醇，殘渣精密加入甲醇-5%鹽酸溶液（4∶1）的混合液25ml，稱定重量，加熱回流30min，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，過0.45μm濾膜［3，4］，即得。

      2.4標(biāo)準(zhǔn)曲線與線性范圍精密吸取槲皮素對照品溶液2，4，6，10，14，20μl進樣測定，按上述色譜條件測定峰面積，以峰面積為縱坐標(biāo)，進樣質(zhì)量數(shù)（μg）為橫坐標(biāo)，進行線性回歸計算，得回歸方程：Y=53819X-45028（r=0.9997），在0.02～0.20μg范圍內(nèi)槲皮素有良好的線性關(guān)系。

      2.5精密度實驗精密吸取槲皮素對照品溶液10μl，連續(xù)進樣6次，記錄色譜圖，槲皮素保留時間tR=15.512，其峰面積相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD值為0.97%（n=6）。

      2.6重復(fù)性實驗分別取同一批余甘子藥材按“2.3”項下方法制備供試品溶液5份，進樣，記錄色譜圖，計算結(jié)果，藥材中槲皮素含量的平均值為0.563g，RSD值為0.89％。

      2.7供試品溶液的穩(wěn)定性實驗取同一份余甘子藥材供試品溶液，室溫下，分別于0，2，6，10，14，18，24h，進樣7次，記錄色譜圖，其峰面積相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD值為1.07%（n=7）。實驗結(jié)果表明供試品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定。

      2.8加樣回收率實驗取已知含量的余甘子粉末6份，每份5g，精密稱定，分別精密加入槲皮索對照品溶液（0.010mg/ml）16ml，按“2.3”項下方法制備供試品溶液，在上述色譜條件下進樣10μl，記錄色譜圖，結(jié)果余甘子的加樣回收率為97.3%，RSD值為0.99%（n=6）。結(jié)果見表1。表1槲皮素加樣回收率結(jié)果（略）

      2.9樣品的測定稱取余甘子藥材5g，按“2.3”項下方法制備供試品溶液，在上述色譜條件下分別進樣10μl，作者采收的云南省新平縣的余甘子藥材中槲皮素含量為0.056mg·g-1（n=2），成都荷花池藥材市場購買的川產(chǎn)余甘子藥材中槲皮素含量為0.086mg·g-1（n=2）。結(jié)果見表2。

      3討論3.1流動相的考察曾考察過甲醇－水-磷酸（50∶50∶0.2）［5］，乙腈-水（36∶64），（40∶60），乙腈-0.4%磷酸（55∶45），（50∶50），（36∶64），甲醇－0.4%磷酸（40∶60），（45∶55），（50∶50）［3］。以甲醇-0.4%磷酸（50∶50）系統(tǒng)對待測成分的分離效果較好。且加入庚烷磺酸鈉在甲醇-0.4%磷酸（50∶50）系統(tǒng)下以每升流動相內(nèi)含1.2g時對峰形的改善效果達(dá)到*值。表2余甘子中槲皮素含量測定結(jié)果（略）

      3.2檢測波長的確定在190～500nm波長范圍內(nèi)進行紫外檢測，槲皮素在373nm波長處有zui大吸收，在此波長處供試液中槲皮素與其他組分色譜峰得到較好分離。

      3.3樣品測定前的處理余甘子粉末極易吸濕，稱量前可在60℃下干燥，經(jīng)比較槲皮素未損失。《中國藥典》2005年版對余甘子藥材去核與否未作規(guī)定，實驗所用的荷花池所售余甘子為去核的，而云南采集的余甘子并未做去核處理，結(jié)果顯示四川產(chǎn)余甘子比云南產(chǎn)余甘子所測槲皮素含量高近1.5倍，且在槲皮素峰后多一小峰，可能與余甘子果核與余甘子果肉中槲皮素含量和化學(xué)成分組成的差異有關(guān)。

      本實驗采用液相色譜法對余甘子中槲皮素的含量進行測定，具有快速、簡便、良好的精密度和準(zhǔn)確性等優(yōu)點，適用于余甘子藥材的質(zhì)量控制。